Infektion med SARS-CoV-2 tidligere kaldet ”Ny Coronavirus 2019-nCoV”
Beslægtet med SARS-CoV og Mers-CoV
Baggrund
Infektion med coronavirus: Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (SARS-CoV-2) giver sygdommen “Coronavirus disease 2019 (COVID-19)
Coronavira inficerer både dyr og mennesker, hvor de i varierede omfang forårsager sygdom
Inkubationstiden for COVID-19 er mellem 1 og 14 dage med en mediantid omkring 5-6 dage
En betydelig del af person-til-person transmission af SARS-CoV-2 virus kan ske før den inficerede selv udvikler symptomer (præsymptomatisk transmission)1
En lille del af de personer, der er inficeret med SARS-CoV-2, udvikler aldrig symptomer, men kan stadig smitte andre og dermed bidrage til spredning af sygdommen 2.
Den test der primært anvendes på hospitaler til diagnostik af aktiv SARS-C
Uden for hospitalerne bruges primært Lateral Flow Immuno Assay (LFIA) tests, også kaldet hurtigtests
Indtil videre er NAAT tests de mest pålidelige test til diagnostik af pågående COVID-19 sygdom
Antistoftest skal være et supplement til NAAT og vil kunne bruges afhængigt af, hvilke antistoffer der bestemmes
Som et af flere diagnostiske redskaber i en samlet vurdering af særlige patientforløb, fx hos børn, der har haft uafklarede og længerevarende sygdomsforløb
Til epidemiologisk overvågning af antallet af personer, der har været smittet, ved, at man gennem regelmæssige testninger kan følge smittetrykket i en udvalgt del af befolkningen
Til at bekræfte klinisk SARS-CoV-2 infektioner, fx hos patienter der har været (hjemme)isoleret uden for udgående NAAT
At identificere personer har haft asymptomatisk SARS-CoV-2 infektion
Til at overvåge effekten af et vaccination hos immunkompromiterede, fx Ptt der får immunosuppresiva, har immundefekter, har kronisk nyresygdom eller anden sygdom, der hæmmer immunsystemet
Till at afgøre i hvilket omfang overstået COVID-19 sygdom har ført til immunitet overfor SARS-CoV-2 virus
Hvordan er antistofresponset under en COVID-19 infektion
Der findes 5 forskellige typer antistoffer: IgA, D, E, G og M. Antistoffer er et af kroppens forsvar mod infektion, og virker ved at binde sig til virus.
Bindingen kan gøre det lettere for kroppen immunceller at ødelægge virus. Det kan også føre til, at virus mister evnen til at trænge ind i kroppens celler og dele sig. Antistoffer, der virker ved at hæmme eller neutralisere virus biologiske virkning kaldes neutraliserende antistoffer.
Antistofrespons ved SARS-CoV-2
Serokovertering
Initialt øget IgM efterfulgt af IgG og IgA antistoffer (se figur som der linkes til nedenfor)
Serokonverteringen, dvs. det tidspunkt hvor der er målbare niveauer af antistoffer mod SARS-CoV-2, indtræder ved COVID-19 ofte dage efter, mængden af virus har toppet4
Derfor kan serologiske test ikke erstatte NAAT i den helt tidlige fase af en SARS-CoV-2 infektion, således var:
kun ca. 30 % serokonverteret en uge efter symptomdebut
ca. 70 % efter 1-2 uger
først efter 2-3 uger var >95 % serokonverteret 5,6,7
Den klassiske opfattelse har været, at IgM antistoffer er til stede før IgG antistofferne, og at skiftet i antistof isotyper sker sekventielt8, og det således er muligt at bruge tilstedeværelsen/mængden af de forskellige isotyper til at skelne akut fra overstået infektion.
Men studier har vist, at der er en betydelig variation i antistofresponset mod SARS-CoV-2.
Hos de fleste kan SARS-CoV-2 IgM måles før SARS-CoV-2 IgG antistofferne
Hos andre fremkommer IgM og IgG stort set samtidigt
Hos endnu andre synes IgG at være til stede før IgM 6,9
Denne variation i antistofresponset er også set hos patienter SARS-CoV-1 infektion (den første SARS-epidemi) 10,11,12
Det varierende IgM respons kendes også fra andre virale infektioner 13,14,15
Samlet synes måling af antistoffer derfor primært at kunne bruges til at fastlægge, i hvilket omfang en patient har produceret de forskellige isotyper af antistoffer, mens det er sværere at bruge antistofmåling til at fastlægge et evt. tidspunkt for infektion med SARS-CoV-2 9
Det, der adskiller de tidlige antistof respons fra de senere, er antistoffernes aviditet; Dvs. evnen til at danne polymerer, der øger antigen-antistofinteraktionen
Jo længere tid der går, siden man blev inficeret, jo højere aviditet 16,9,17
Desværre findes der endnu ikke automatiserede assay til at bestemme dette for SARS-CoV-2, men ofte vil det indirekte vise sig ved en stigende titer udmiddelbart efter vaccination/infektion
Forskelle i måling af antistoffer
Der er forskellige analyser til måling af SARS-CoV-2 antistoffer
Nogle test måler den totale mængde af antistoffer (det vil sige summen af IgA, IgG og IgM)
Andre måler mængden af hver enkel klasse antistoffer (IgA, IgG og IgM)
Hvis hver enkel klasse måles, er det også forskelligt, om der måles IgA, IgG og IgM eller kun IgG og IgM
Typer af Sars-CoV-2 antistoffer
Foruden forskelle i antistof isotyper, der bestemmes, er der også forskelle i, hvilken del af virus de antistoffer, der måles, er rettet i mod
Spikeprotein antistoffer.
De fleste er rettet mod spike-proteinet, som er det protein SARS-CoV-2 bruger til at binde sig til ACE2-receptoren for at komme ind i kroppens celler.
Andre er rettet nukleocapsid proteinet. mRNA vaccinerne indeholder ikke sekvenser der koder for Nucleoprotein
Der synes dog ikke at være den store forskel i, hvornår der fremkommer antistoffer mod de forskellige proteiner 18
Derfor kræver tolkningen af antistofsvar, at disse sammenholdes med patients klinik, sygehistorie og resultaterne af NAAT-testen.
OBS: Det vil ikke fremgå af laboratoriesvaret, hvilket protein de antistoffer, der måles, er rettet imod. Det kan det laboratorium, der udfører analysen, dog altid oplyse.
Hvordan måles antistoftest for COVID-19; Coronavirus SARS-CoV-2 Ab?
Der er to typer af antistoftest for SARS-CoV-2 (nCOV-19).
ELISA-testen udført på almindelige blodprøveglas
Hurtigtest udført på bloddråbe, hvor du typisk får et prik i fingeren, og i løbet af 10-20 minutter får at vide, om du har dannet antistoffer eller ej
ELISA-testen
ELISA (forkortelse fra engelsk enzyme-linked immunosorbent assay) er en metode til præcist at bestemme små koncentrationer af antigener eller antistoffer. ELISA-testen er mere præcis end en hurtigtest, og svaret viser, hvor mange antistoffer du har dannet. Udføres i dag fuldautomatisk på laboratoriernes standardudstyr
Denne type test kan både måle den totale mængde antistof mod SARS-CoV-2 og mængden af hver enkel klasse SARS-CoV-2 antistof hver for sig
Disse test er kvantitative
Svaret vil typisk være klar i løbet af en dag efter, prøven er kommet til laboratoriet
Dette er de foretrukne test på hospitaler, da det er den mest følsomme af de to test
ELISA testene er kvantitative
Der findes en international standard for Spikeprotein antistof-titeren. Spikeprotein antistof-titeren siger noget om grad immunitet. Men desværre er det på grund af variationer i proteinsekvensen mellem de spikeproteiner, der findes i de virusstammer, der cirkulerer på et givet tidspunkt og de, der anvendes i de standardiserede analyser, ikke muligt at fastlægge en præcis grænse for, hvornår man er immun
Hurtigtesten (finger priktesten)
Der prikkes hul i fingeren med en lancet, og der dryppes 1-2 dråber blod ned i en lille plastikkassette
Herefter tilsættes 1-2 dråber reaktionsvæske, som får blod og væske til at trække op i kassetten
Hvis der foruden kontrolstriben også fremkommer en stribe ud for den klasse antistoffer, der måles, er testen positiv
Princippet i disse test minder om hjemme-graviditetstest
Disse test måler typisk enten IgG eller IgM eller begge
Disse bruges stort set ikke på hospitaler
En af udfordringerne er, at nogle af testene ikke er lige så følsomme som ELISA-testen
Det betyder, at personen kan have SARS-CoV-2 antistoffer, uden at hurtigtesten kan måle det (falsk negativ test)
En anden udfordring har været, at nogle af testene en gang i mellem er blevet positive, selvom personen ikke har dannet SARS-COV-2 antistoffer (falsk positiv test)
Referenceintervaller
SARS-CoV-2-Ab
Negativ: Der er ikke påvist antistoffer mod SARS-CoV-2
Gråzone: Der er ikke sikkert påvist antistoffer mod SARS-CoV-2. Prøven bør gentages for at følge udviklingen i antistofresponset
Positiv: Der er påvist antistoffer mod SARS-CoV-2
Indikationer
Antistof-testene er et specialværktøj, der skal bruges til:
Epidemiologisk overvågning af antallet af personer, der har været smittet, ved at man gennem regelmæssige testninger kan følge serokonkverteringen i en udvalgt del af befolkningen
Som et af flere diagnostiske redskaber i en samlet vurdering af særlige patientforløb, fx hos børn, der har haft uafklarede og længerevarende sygdomsforløb. Dette med henblik på at afklare immunfunktonen og om Pt danner antistoffer
At bekræfte klinisk SARS-CoV-2 infektioner, fx hos patienter der har været (hjemme)isoleret uden for udgående NAAT. (Her skal man primært bruge nucleoprotein Ab tests)
At identificere personer har haft asymptomatisk SARS-CoV-2 infektion (Her skal man primært bruge nucleoprotein Ab tests)
At overvåge effekten af et evt. vaccinationsprogram (Her skal man primært bruge spike glycoprotein Ab tests)
Prøvetagning
Veneblodprøve
Analyserne kan udføres på serum eller heparin plasma, afhængigt af det lokale laboratoriums valg
Fortolkning
Som det fremgår af baggrundsafsnittet, kræver tolkningen af antistofsvar, at disse sammenholdes med patientens klinik, sygehistorie og resultaterne af NAAT-testen.
Er man immun mod SARS-CoV-2, hvis man har antistoffer:
Det immunologiske respons og den sygdom forårsaget af SARS-CoV-2 ligner det, der blev set ved SARS-CoV-1 (den første SARS-epidemi)
Immunitet ved SARS-CoV infektion krævede både respons fra både det innate og det adaptive immunsystem
Mht. til antistoffer skal disse være neutraliserende (dvs. hæmme virus evne til at inficere og dermed sprede sig)
Det må dog afklares, i hvilket omfang de nuværende assays faktisk måler neutraliserende antistoffer, før vi med sikkerhed kan udtale os om graden af immunitet
Infektion med humane coronavira inducerer ikke altid langvarige antistofrespons. Derfor er det muligt for samme person, når antistofresponset er svundet over en længere periode, at blive inficeret med samme virus igen
Re-infektion sker dog kun hos en lille del af dem, der tidligere har været inficeret, og resulterer ofte i milde eller ingen symptomer 20
Antistof-titrene hos personer, der overlevede SARS-CoV-1 eller MERS-CoV-infektioner, aftog og var ofte meget lave/umålelige efter 2-3 år 21,22 eller oprindeligt var svage 23
Sammenhæng mellem SARS-CoV-2 test og virusmængde og positiv test
Den hyppigste fejl er forkert timing i forhold til smittetidspunktet.
Testene er generelt meget robuste, men interferens fra heterofile antistoffer kan forekomme. Det er dog meget sjældent, men bør altid overvejes, hvis der et betydeligt misforhold mellem testresultatet og patientens klinik
He X, Lau EHY, Wu P, Deng X, Wang J, Hao X, Lau YC, Wong JY, Guan Y, Tan X, Mo X, Chen Y, Liao B, Chen W, Hu F, Zhang Q, Zhong M, Wu Y, Zhao L, Zhang F, Cowling BJ, Li F, Leung GM. Temporal dynamics in viral shedding and transmissibility of COVID-19. Nat Med. 2020; 26.; 672-675.
Vis kilde
Li R, Pei S, Chen B, Song Y, Zhang T, Yang W, Shaman J. Substantial undocumented infection facilitates the rapid dissemination of novel coronavirus (SARS-CoV-2). Science. 2020; 368.; 489-493.
Vis kilde
To KK, Tsang OT, Leung WS, Tam AR, Wu TC, Lung DC, Yip CC, Cai JP, Chan JM, Chik TS, Lau DP, Choi CY, Chen LL, Chan WM, Chan KH, Ip JD, Ng AC, Poon RW, Luo CT, Cheng VC, Chan JF, Hung IF, Chen Z, Chen H, Yuen KY. Temporal profiles of viral load in posterior oropharyngeal saliva samples and serum antibody responses during infection by SARS-CoV-2: an observational cohort study. Lancet Infect Dis. 2020; 20.; 565-574.
Vis kilde
Wölfel R, Corman VM, Guggemos W, Seilmaier M, Zange S, Müller MA, Niemeyer D, Jones TC, Vollmar P, Rothe C, Hoelscher M, Bleicker T, Brünink S, Schneider J, Ehmann R, Zwirglmaier K, Drosten C, Wendtner C. Virological assessment of hospitalized patients with COVID-2019. Nature. 2020; 581.; 465-469.
Vis kilde
Zhao J, Yuan Q, Wang H, Liu W, Liao X, Su Y, Wang X, Yuan J, Li T, Li J, Qian S, Hong C, Wang F, Liu Y, Wang Z, He Q, Li Z, He B, Zhang T, Fu Y, Ge S, Liu L, Zhang J, Xia N, Zhang Z. Antibody responses to SARS-CoV-2 in patients of novel coronavirus disease 2019. Clin Infect Dis. 2020..
Vis kilde
Deeks JJ, Dinnes J, Takwoingi Y, Davenport C, Spijker R, Taylor-Phillips S, Adriano A, Beese S, Dretzke J, Ferrante di Ruffano L, Harris IM, Price MJ, Dittrich S, Emperador D, Hooft L, Leeflang MM, Van den Bruel A, Cochrane COVID-19 Diagnostic Test Accuracy Group.. Antibody tests for identification of current and past infection with SARS-CoV-2. Cochrane Database Syst Rev. 2020; 6.; CD013652.
Vis kilde
Xu Z, Zan H, Pone EJ, Mai T, Casali P. Immunoglobulin class-switch DNA recombination: induction, targeting and beyond. Nat Rev Immunol. 2012; 12.; 517-31.
Vis kilde
Bauer G. The variability of the serological response to SARS corona virus-2: Potential resolution of ambiguity through determination of avidity (functional affinity). J Med Virol. 2020..
Vis kilde
Woo PC, Lau SK, Wong BH, Tsoi HW, Fung AM, Chan KH, Tam VK, Peiris JS, Yuen KY. Detection of specific antibodies to severe acute respiratory syndrome (SARS) coronavirus nucleocapsid protein for serodiagnosis of SARS coronavirus pneumonia. J Clin Microbiol. 2004; 42.; 2306-9.
Vis kilde
Li G, Chen X, Xu A. Profile of specific antibodies to the SARS-associated coronavirus. N Engl J Med. 2003; 349.; 508-9.
Vis kilde
Hsueh PR, Huang LM, Chen PJ, Kao CL, Yang PC. Chronological evolution of IgM, IgA, IgG and neutralisation antibodies after infection with SARS-associated coronavirus. Clin Microbiol Infect. 2004; 10.; 1062-6.
Vis kilde
Zaaijer HL, Mimms LT, Cuypers HT, Reesink HW, van der Poel CL, Taskar S, Lelie PN. Variability of IgM response in hepatitis C virus infection. J Med Virol. 1993; 40.; 184-7.
Vis kilde
Racine R, Winslow GM. IgM in microbial infections: taken for granted?. Immunol Lett. 2009; 125.; 79-85.
Vis kilde
De Paschale M, Clerici P. Serological diagnosis of Epstein-Barr virus infection: Problems and solutions. World J Virol. 2012; 1.; 31-43.
Vis kilde
Hedman K, Rousseau SA. Measurement of avidity of specific IgG for verification of recent primary rubella. J Med Virol. 1989; 27.; 288-92.
Vis kilde
Hedman K, Seppälä I. Recent rubella virus infection indicated by a low avidity of specific IgG. J Clin Immunol. 1988; 8.; 214-21.
Vis kilde
Haveri A, Smura T, Kuivanen S, Österlund P, Hepojoki J, Ikonen N, Pitkäpaasi M, Blomqvist S, Rönkkö E, Kantele A, Strandin T, Kallio-Kokko H, Mannonen L, Lappalainen M, Broas M, Jiang M, Siira L, Salminen M, Puumalainen T, Sane J, Melin M, Vapalahti O, Savolainen-Kopra C. Serological and molecular findings during SARS-CoV-2 infection: the first case study in Finland, January to February 2020. Euro Surveill. 2020; 25..
Vis kilde
Zhou G, Zhao Q. Perspectives on therapeutic neutralizing antibodies against the Novel Coronavirus SARS-CoV-2. Int J Biol Sci. 2020; 16.; 1718-1723.
Vis kilde
Callow KA, Parry HF, Sergeant M, Tyrrell DA. The time course of the immune response to experimental coronavirus infection of man. Epidemiol Infect. 1990; 105.; 435-46.
Vis kilde
Liu W, Fontanet A, Zhang PH, Zhan L, Xin ZT, Baril L, Tang F, Lv H, Cao WC. Two-year prospective study of the humoral immune response of patients with severe acute respiratory syndrome. J Infect Dis. 2006; 193.; 792-5.
Vis kilde
Wu LP, Wang NC, Chang YH, Tian XY, Na DY, Zhang LY, Zheng L, Lan T, Wang LF, Liang GD. Duration of antibody responses after severe acute respiratory syndrome. Emerg Infect Dis. 2007; 13.; 1562-4.
Vis kilde
Choe PG, Perera RAPM, Park WB, Song KH, Bang JH, Kim ES, Kim HB, Ko LWR, Park SW, Kim NJ, Lau EHY, Poon LLM, Peiris M, Oh MD. MERS-CoV Antibody Responses 1 Year after Symptom Onset, South Korea, 2015. Emerg Infect Dis. 2017; 23.; 1079-1084.
Vis kilde
Fagmedarbejdere
Lennart Friis-Hansen
overlæge, dr. med., Klinisk Biokemisk Afdeling, Bispebjerg og Frederiksberg Hospital
Jette Kolding Kristensen
praktiserende læge, professor, ph.d., Center for Almen Medicin ved Aalborg Universitet
Har du en kommentar til artiklen?
Bemærk venligst, at du IKKE vil modtage svar på henvendelser, der omhandler din egen sygdom, pårørendes sygdom, blodprøvesvar, hjælp til at udarbejde skoleopgaver og litteratursøgning.
